核酸提取是生物学试验的重要步骤,想要对生物的核酸进行检测,就要先从生物样本中提取出核酸,而核酸提取试剂盒就是专用于核酸提取的试剂。很多人都不太了解核酸提取试剂盒的工作原理,今天慧庆小编就为大家介绍这类试剂盒的工作原理与操作步骤。
一、核酸提取试剂盒的工作原理
1、磁珠法核酸提取试剂盒
磁珠法核酸提取试剂有着提取速度快、得率高、纯度高的特点,是目前被广泛推广使用的核酸提取试剂。其工作原理是利用生物磁珠高活性的表面基团与生物样本中的核酸进行特异性识别和快速结合,接着再利用生物磁珠的超顺磁性,加入变性剂(如:盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外磁场的作用下,将核酸从生物样本中分离出来,采用此种方法提取出来的核酸可以用于分子生物学研究、临床疾病诊断、法医学鉴定、输血安全等多种领域。
2、离心柱法核酸提取试剂盒
这类试剂盒的工作原理是将对核酸有吸附作用的官能基团固定在离心柱模上,然后加入不同的裂解试剂、洗涤试剂并反复离心,将核酸与杂质分离,获得纯化的核酸。
二、核酸提取试剂盒的操作步骤
1、磁珠法核酸提取试剂盒
先使用裂解液破坏细胞结构,使得生物样本中的核酸能够充分游离出来,然后加入磁珠结合液,让核酸与磁珠能够充分结合,接着加入洗涤液,多次洗涤去除残留的杂质,然后加入洗脱液,分离核酸与磁珠,得到高质量的核酸溶液。
2、离心柱法核酸提取试剂盒
先加入含有高浓度离液盐的裂解缓冲液,再加入消化缓冲液,使蛋白质变性、消化,暴露DNA,恒温孵育几分钟,然后加入试剂沉淀DNA,接着将其转移到吸附柱以后经过高速离心或者负压法的操作,核酸会特异地吸附到硅胶膜上。接着加入漂洗液,在高速离心以后杂质会被甩出离心柱。之后加入洗脱液,把硅胶模上吸附的核酸洗脱下来,在高速离心之后就可以得到纯化的核酸溶液。
关于核酸提取试剂盒的工作原理与操作步骤,以上就慧庆小编带来的相关介绍,希望能够对您有所帮助。目前常用的两种核酸提取试剂盒,磁珠法与离心柱法都有着各自的优势,使用者可以根据自身需求进行选择。如果您还有其他疑问,欢迎随时来电咨询洛阳慧庆生物科技有限公司,我们会及时解答您的疑惑。