核酸提取试剂是提取生物样本核酸的辅助试剂,研究人员利用其可以将生物样本中的DNA、RNA提取出来,用于下游实验室、检测机构。很多人都想知道常见核酸提取试剂有哪些?目前常见的核酸提取试剂有核酸提取试剂(磁珠法),核酸提取试剂(离心柱法)这两种,下面慧庆小编就为大家介绍这两类试剂的提取原理以及注意事项。
一、核酸提取试剂的提取原理
1、核酸提取试剂(离心柱法)
核酸提取试剂(离心柱法)的是一种比较简单的用于微量核酸分离纯化的方法,属于硅吸附方法的一种,其提取原理是利用裂解液使得细胞破碎,将细胞中的核酸释放出来,然后把释放出来的核酸特异吸附在特定的硅载体上,这种载体只对核酸有比较强的亲和力和吸附力,而对蛋白质、脂类以及多糖等其他生化成分,则基本不吸附,因此离心时被甩出柱子。接着再利用洗脱液将吸附在特异载体上的核酸洗脱下来,分离得到纯化后的核酸。
2、核酸提取试剂(磁珠法)
核酸提取试剂(磁珠法)是目前应用范围比较广的试剂,相比离心柱法,它操作简单,提取速度快、得率好、纯度高,因此得到了广泛推广和使用。它的提取原理是运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰,对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰,通过高活性的表面活性基团与核酸分子特异性识别和快速结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性,在变性剂(盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外磁场的作用下,能从血液、组织、食品、病原微生物等样本中分离核酸。
二、使用核酸提取试剂的注意事项
1、使用核酸提取试剂之前,应当仔细阅读试剂说明书,并且按照说明书上仔细操作。
2、操作人员应当经过相关培训且有一定的经验,在作业过程中需要戴好口罩、手套。
3、实验室所用的耗材需保证RNase free,实验结束后应当立即清洁工作台。
4、使用试剂前,低温保存的核酸提取试剂应当恢复到室温后再行使用,试剂应充分混匀。
5、不同批号的试剂不能混用,超出有限期的产品严禁使用。
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