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磁珠法核酸提取的步骤及原理是什么?

时间:2022-06-16 17:11:27 来源:洛阳慧庆生物科技有限公司
  磁珠法核酸提取是目前正在普遍地使用的DNA提取方法,利用磁珠法核酸提取,能够在保证检验准确性的情况下,实现核酸提取的自动化以及批量化,这是其他DNA提取方法无法相比的。那么磁珠法核酸提取的步骤和原理是什么样的?针对这个问题,接下来慧庆小编就为大家带来相关介绍。
  

  一、磁珠法核酸提取的步骤

  
  磁珠法核酸提取的步骤通常分为四步,先是裂解,接着结合,然后洗涤、洗脱,成功提取核酸。
  

  1、裂解

  
  核酸是从细胞或者是其他的生物物质中释放出来的,因此提取核酸需要先进行裂解,裂解步骤可以通过化学作用、机械作用以及酶作用等方法来实现。酶作用主要就是在样本中加入溶菌酶或蛋白酶使得细胞破裂,释放出核酸。蛋白酶还可以降解与核酸结合的蛋白质,促进核酸的分离。
  

  2、结合

  
  经过裂解后的样本离心处理后取上清,接着加入振荡混合均匀的磁珠结合液,将两者混合均匀,置于磁力架上进行磁分离,弃废液(吸净管盖及管底残液)。
  

   3、洗涤

  
  核酸的高电荷磷酸骨架使其更具有亲水性,根据其与其他大分子物质理化性质的差异,可以用选择性沉淀、层析、密度梯度离心等方法可将核酸分离、纯化。
  
  通常会采用无水乙醇沉淀DNA,乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,是理想的沉淀剂。
  

   4、洗脱

  
  经过洗涤后的样本,加水或者EB破坏高盐环境,形成低盐环境,使DNA从磁珠上脱落。
  磁珠法核酸提取

  二、磁珠法核酸提取的原理

  
  磁珠法核酸提取的原理是,通过裂解液裂解样本中的细胞组织,利用磁珠的吸附性能,将游离出来的核酸分子吸附到磁珠表面,在这个过程中蛋白质等杂质不会被吸附,而是留在了溶液中。将吸附着核酸的磁珠转移到不同的试剂槽内,通过反复快速搅拌、混匀液体,经过细胞裂解、核酸吸附、洗涤与洗脱等步骤,得到纯净的核酸。
  
  关于磁珠法核酸提取的步骤及原理,以上就是慧庆小编带来的相关介绍。随着磁珠法核酸提取技术的不断发展进步,DNA提取才真正开始实现标准化、快速化和自动化。洛阳慧庆生物科技有限公司研发生产有多种生物磁珠,如果你有相关需求,欢迎来电咨询我们。
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